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液相色譜系統(tǒng)中液相色譜法的分類和發(fā)展

更新時間:2017-11-01        閱讀:2422
液相色譜系統(tǒng)中液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。

液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。

液相色譜法有“三高一廣一快”的特點:
高壓:流動相為液體,流經(jīng)色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
:分離效能高??蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到*分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
高靈敏度:紫外檢測器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。
應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢。
分析速度快、載液流速快:較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時。

此外液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點,但也有缺點,與氣相色譜相比各有所長,相互補(bǔ)充。液相色譜的缺點是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測器之間,除了柱子以外的任何死空間(進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測池等)中,如果流動相的流型有變化,被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬,柱效率降低。液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

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