高效液相色譜柱在使用時(shí)要注意的問題
高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動(dòng)時(shí), 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
柱效和保護(hù)柱
拿到一根新柱時(shí),一定要先看其使說明,然后測柱效,定期檢測柱效, 保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件, 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應(yīng)用于在線監(jiān)測, 應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù), 例如采取安裝在線過濾器, 自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計(jì),優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效, 在需要高柱效的時(shí)候常用, 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染。缺點(diǎn)是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效, 特別是在用微柱時(shí),常用的是普通 自裝填料的保護(hù)柱。新出的一些保護(hù)柱例如Sentry—guard保護(hù)柱, 它的特點(diǎn)是高質(zhì)量、高效填料、 增加分析柱效、對臟樣品載荷能力大 ,能延長保護(hù)柱的壽命,手可擰緊接頭,安裝時(shí)不需要工具,省時(shí)省,可換芯式設(shè)計(jì),能采用各種不同的填料,主要適用于臟、復(fù)雜的樣品本底,例如生化樣品,環(huán)境樣品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情況。