高效液相色譜是應(yīng)用zuì多的色譜分析方法,
高效液相色譜系統(tǒng)一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)(色譜柱)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成,具體包括儲(chǔ)液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC儀的關(guān)鍵部分。
1、溶劑輸送系統(tǒng):
儲(chǔ)液器:用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動(dòng)相。配有溶劑過濾器,以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
脫氣器:脫氣的目的是為了防止流動(dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測器,從而引起噪聲,不能正常檢測。
輸液泵:將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過程。
梯度洗脫裝置:是在分離過程中通過逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進(jìn)樣系統(tǒng):
進(jìn)樣器:是高效液相色譜系統(tǒng)中將樣品送入色譜柱的裝置,進(jìn)樣方式可以分為兩種:閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
3、分離系統(tǒng):
色譜柱:對樣品進(jìn)行分離,是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟,它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統(tǒng):
檢測器:是高效液相色譜系統(tǒng)的眼睛,在色譜分析中占據(jù)著重要的地位,主要作用是將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號(hào),被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖。
高效液相色譜系統(tǒng)常用的檢測器一般有五種,包括紫外檢測器(用途zuì廣的檢測器),示差檢測器(糖類,糖類化合物等),蒸發(fā)光散射檢測器(黃芪等中藥材),熒光檢測器(黃曲霉等),二極管陣列檢測器,具體選擇哪款檢測器,可以根據(jù)自己的實(shí)際需要選擇。
5、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng):
色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)在數(shù)據(jù)采集時(shí)能對進(jìn)樣器、泵及閥進(jìn)行實(shí)時(shí)控制,可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣,數(shù)據(jù)采集、泵及閥控制、數(shù)據(jù)處理、定性定量分析、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)、報(bào)告輸出等分析過程的*自動(dòng)化。