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3-24在液相色譜分析過程中,誤點擊液相色譜工作站缺省設置可能導致方法參數(shù)丟失、數(shù)據(jù)混亂等嚴重后果。面對這種突發(fā)情況,需要采取系統(tǒng)性的應急處理措施,以最大限度地減少損失并恢復正常分析工作。首要任務是立即停止當前分析。按下儀器緊急停止按鈕,防止錯誤設置影響正在進行的分析。檢查數(shù)據(jù)采集狀態(tài),...
紫外檢測器的使用覆蓋面達到HPLC檢測器的75%,在各個領域得到了廣泛的應用,特別是在藥品、環(huán)保、生命科學、糧食科學、農(nóng)業(yè)科學、食品科學、醫(yī)療衛(wèi)生等領域,應用更加廣泛。國際上生產(chǎn)HPLC的廠商很多,無一不帶紫外檢測器。中國也有10幾家生產(chǎn)HPLC的企業(yè)?;旧隙紟ё贤鈾z測器。有的HPLC只有紫外檢測器一種,而無其它類型的檢測器。紫外檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。...
C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同,內(nèi)徑的差異等多方面因素,呈現(xiàn)出不同選擇性。這樣,在市場上就出現(xiàn)了數(shù)百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱。對于傳統(tǒng)的C18色譜柱,pH值使用范圍通常為2~7,因為pH值高于8時C18固定相會受到限制。由于殘余硅羥基的存在,易對堿性化合物造成不可逆吸附,造成峰拖尾,影響分離與分析。pH值太低則會使鍵合的烷基脫落,而且對成分的分離達不到要求。1、酸性條件下C18的選擇為了改善C18色譜柱在低pH值時的穩(wěn)定性,有人提出了空間位阻...
紫外檢測器(ultraviolet-visibledetector,UVD)是HPLC中應用廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外檢測器主要由光源、分光系統(tǒng)、檢測池和檢測系統(tǒng)四大部分組成,從光源分光系統(tǒng)得到的特定波長的單色光通過檢測池時,一部分光被溶液中的吸光性溶質(zhì)吸收,剩余的透射光到達檢測系統(tǒng)后光信號轉(zhuǎn)換成電信號...
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。只有了解影響色譜柱性能的因素,才能結(jié)合目標分析物的性質(zhì)、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。(1)硅膠純度硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。(2)色譜柱尺寸填料床的長度和內(nèi)徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約...
液相色譜檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。1、按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射)、熱學檢測器(如吸附熱)、電化學檢測器(如極譜、庫侖、安培)、電學檢測器(電導、介電常數(shù)、壓電石英頻率)、放射性檢測器(閃爍計數(shù)、電子捕獲、氦離子化)以及氫火焰離子化檢測器。2、按測量性質(zhì)可分為通...
液相色譜分析柱包含EP-C18、WP-C18、EP-C8、WP-C8等,均是由一種全新的化學鍵合技術進行合成的。*鍵合技術的使用保證了色譜柱具有優(yōu)異的分離特性,使一些通常難于進行的分離變得可能。液相色譜分析柱主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分...
色譜柱溫度,不僅影響色譜過程的熱力學因素,也影響傳質(zhì)過程的動力學因素。柱溫變化,不僅影響柱前端壓力、載氣流速等,更重要的是對物質(zhì)的分離、分析結(jié)果帶來影響。氣相色譜中,柱溫是影響化合物保留時間的重要因素。使用中,應注意柱溫的選擇,因為柱溫關系到:①色譜柱固定液的壽命。若柱溫高于固定液的最高使用溫度,則會造成固定液隨載氣流失,不但影響柱的壽命,而且固定液隨載氣進入檢測器,將污染檢測器,影響分析結(jié)果。②分離效能和分析時間。若柱溫過高了,會使各組分的分配系數(shù)K值變小,分離度減??;但柱...
液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。關于儀器各部分的養(yǎng)護:1、泵。泵是液相色譜儀的心臟。處于良好工作狀態(tài)的泵,基線平穩(wěn),保留時間重現(xiàn)性好,梯度洗脫時壓力變化緩慢而且平穩(wěn)。1)選擇溶劑和試劑,在進入儀器前用0.45um膜過濾,并進行脫氣處理。2)泵開始使用時,一定要用合適的流動相*清洗干凈。3)定期檢查并更換在線過濾片及有關的墊圈,經(jīng)常清...
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